Приготування проб для посіву і проведення аналізу
Для приготування першого розведення (1:10) асептично підготовляють проби із середнього шару зразка масою (10,0+-0.1) г. Зразок нарізають дрібними смугами і поміщають в колбу місткістю 200 см3. До кожної проби добавляють 100 см3 стерильної водопровідної води з рН=7.2-7.4 або фосфатного буфера (п.5.1.2) і перемішують на апараті для струшування рідин протягом (5 +- 1) хв.
Після відстоювання проби стерильною піпеткою на 1,0 см3 набирають 1,0 см3 рідини і переносять в пробірку, яка вміщує 9,0 см3 стерильної водопровідної води або розведеного буфера і перемішують (розведення 1:100).
Наступні розведення в залежності від припустимої обсіяності зразка 1:1000; 1:10000 і т.д. готуються аналогічно.
По 1,0 см3 кожного розведення вносять в три чашки Петрі, заливають 6-7 см3 розплавленого і охолодженого до температури 45 град.С МПА (м'ясо-пептонний агар, п.5.2.1) з масовою часткою 1.5% і старанно перемішують, чашки залишають до застигання агару, потім перевертають кришками униз і вміщують у термостат. Інкубація проводиться протягом (48 +- 3) год. за температури 37 град.С.
Після інкубації підраховують кількість колоній у кожній чашці, розміщуючи її вверх дном на темному фоні, користуючись лупою із збільшенням у шість разів.
Оцінюють тільки ті розведення, при висіві яких на чашці виросло від 20 до 300 колоній.
Кожну враховану колонію відмічають на дні чашки чорнилом. Можна підрахунок колоній проводити за допомогою спеціального приладу.
Для визначення кількості мікроорганізмів в 1,0 г проби обчислюють кількість колоній, які виросли на чашках кожного розведення, потім множать на ступінь розведення і підраховують середнє арифметичне.