Перед постановкою РЗГА необхідно перевірити правильність вибраної робочої дози вірусу (4 ГАО). Для цього в 4 лунки одного ряду і 3 лунки контрольного ряду наливають по 0,25 мл ФБР. У першу лунку з 4 наливають 0,25 мл робочої дози вірусу. Новою піпеткою суміш тричі піпетують, а потім переносять по 0,25 мл в наступну лунку і т. ін. Із останньої лунки 0,25 мл суміші видаляють у дезрозчин. Після цього у лунки з антигеном та лунки контрольного ряду додають 0,25 мл 1%-ного розчину еритроцитів півнів, струшують круговими рухами і залишають при кімнатній температурі (18-20 град. С) на 30-45 хвилин.
Облік реакції проводять після осідання еритроцитів у контролі. При правильному виборі робочої дози вірусу (4 ГАО) у першій та другій лунках повинна бути повна аглютинація ("парасолька"), а в третій може бути часткова (+); у четвертій - аглютинація відсутня ("ґудзик") - негативний результат.
При одержанні інших показників з основного розведення вірусу готують нове робоче розведення (більше або менше).
Більше розведення готують за наявності аглютинації в 4-й лунці, менше - за відсутності аглютинації в 2-й лунці, тобто збільшують або зменшують концентрацію вірусу. Якщо аглютинація проявляється лише в 4-й лунці, то 1 мл вірусу розчиняють в 24 мл ФБР, додаючи до вихідного розрахункового об'єму (1:16) ще половину, а якщо аглютинація відсутня в 2-й лунці, то 1 мл вірусу розчиняють в 8 мл ФБР, тобто беруть половину первинного розрахункового об'єму. Після приготування нового робочого розведення знову ставлять контроль до отримання необхідного результату в реакції аглютинації.