Нативну сперму після одержання витримують при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, після чого розбавляють у два - три рази лактозо-жовтково-трис-цитрато-гліцериновим середовищем такого складу:
Вода дистильована, ГОСТ 6709-72, мл - 100
Лактоза, ОСТ-4953-85, г - 13
Курячий жовток, мл - 30
Трис - (оксиметил) амінометан, ТУ-6-09-4292-76,г - 0,6
Кислота лимонна, ГОСТ 3652-69,г - 0,3
Гліцерин, ГОСТ 6259-75, мл - 9,0
Спермосан-3, ГОСТ 22636-77, тис. од. - 50
Примітка. Цей розбавник готується у два прийоми. Спочатку на точних вагах відважують 13 г лактози і розчиняють у 100 мл дистильованої води при температурі 90 град. C, а після охолодження до 40 град. C у розчин уносять 30 мл жовтка. Ретельно перемішують за допомогою магнітної мішалки до отримання однорідної суспензії. Потім відміряють 100 мл цієї суспензії і розчиняють у ній послідовно трис (0,6 г), кислоту лимонну (0,3 г) і останнім уносять гліцерин (9 мл).