Зняття культури лімфоцитів периферійної крові і отримання препаратів метафазних хромосом
По завершенні культивування:
уміст флаконів зливають у центрифужні пробірки та центрифугують протягом 10-20 хв при 1000 об/хв (режим центрифугування при всіх наступних обробках такий самий);
надосадову рідину відсмоктують або обережно зливають;
осад струшують, у пробірку додають підігрітий до температури 37 град.С гіпотонічний розчин (0,5%) KCl;
клітинну суспензію ретельно перемішують, використуючи пастерівську піпетку з гумовою грушею;
інкубують 10 хв при температурі 37 град.С;
центрифугують;
видаляють надосадову рідину;
клітинну суспензію фіксують у свіжоприготовленому та охолодженому фіксаторі (метиловий спирт, крижана оцтова кислота у співвідношенні 3:1);
зафіксовану суспензію клітин залишають у холодильнику при температурі 4 град.С на термін від 20 хвилин до 20 годин;
клітинну суспензію проводять ще через 2-3 зміни фіксатора;
отриману клітинну суспензію розчиняють невеликою кількістю свіжого фіксатора до бажаної густини;
наносять 3-4 краплі клітинної суспензії на знежирене предметне скло, препарат підпалюють чи висушують гарячим струменем повітря.
Якість отриманого препарату оцінюють під мікроскопом. Розкиданість хромосом контролюють у затемненому полі мікроскопа. Якщо розкиданість хромосом недостатня, суспензію проводять ще через одну зміну фіксатора, змінивши співвідношення компонентів на 2:1 чи додають у пробірку кілька крапель оцтової кислоти.