Постановка культури лімфоцитів периферійної крові
У флакони вводять 0,5 мл крові та поживне середовище такого складу:
5 мл середовища 199 (Ерла, Ігла) або RPMI 1640;
1 мл інактивованої сироватки крові великої рогатої худоби або людини IV групи (сироватку інактивують у водяній бані при 56 град.С протягом 1 години);
0,01 мл ФГА "Р" або 0,1 мл ФГА "М" чи конканаваліну А;
антибіотики в концентрації 100 од. пеніциліну та 100 мкг стрептоміцину або 0,001мл гентаміцину на 1 мл середовища.
Суспензію перемішують, ставлять у термостат при температурі 37 град.С на 48 годин.
За дві години до зняття культури в кожен флакон уводять колхіцин у кінцевій концентрації 0,05 мкг/мл. Маточний розчин колхіцину готують на дистильованій воді (10 мг сухого колхіцину на 100 мл води) та зберігають при температурі 4 град.С 1-2 місяці. Для одержання препаратів, збагачених клітинами на стадіях ранньої мета- та прометафази, за 2 години до фіксації (можна одночасно з колхіцином) додають розчин етидіум броміду в кінцевій концентрації 5-10 мкг/мл. Починаючи з цього етапу, допускається проведення робіт у нестерильних умовах.