Інструкція з проведення тестування племінних тварин за ДНК-маркерами, п. 3.3.1.1

Чинна редакція від 01.06.2004 · Інструкція набрав чинності 27.06.2004

Інструкція з проведення тестування племінних тварин за ДНК-маркерами

Виділення ДНК із крові:

до 2-500 мкл крові або гомогенізованих тромбів додають 1000 мкл стерильної дистильованої води та перемішують на мікрозмішувачі типу "Vortex";

суміш інкубують протягом 15-30 хв за кімнатної температури, періодично перемішують шляхом струшування;

центрифугують протягом 1 хв при 6000 об/хв;

обережно видаляють надосадову рідину, залишають 20-30 мкл рідини над осадом;

додають 170-180 мкл 5%-ного стерильного водяного розчину "Chelex-100";

інкубують протягом 15-30 хв. при температурі 56 град.С;

ретельно перемішують шляхом струшування та витримують 8 хв. на водяній бані при температурі 100 град.С;

ретельно перемішують шляхом струшування;

центрифугують протягом 5 хв. при 6000 об/хв.

Для ампліфікації використовують 5 мкл надосадової рідини, яка містить ДНК. Зберігають зразки при температурі -20 град.С. Після кожного розморожування зразки перемішують та центрифугують протягом 5 хв. при 6000 об./хв.